凝膠成像儀,是指對DNA或RNA膠進(jìn)行切膠、拍照、觀察、分析的實驗室類儀器。化學(xué)發(fā)光/多色熒光/可見光凝膠成像系統(tǒng)可用于與從紫外到紅、綠、藍(lán)三色光波段的所有熒光和可見光樣品的拍攝和分析??傮w來說,凝膠成像系統(tǒng)主要用于對蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等生物分子的分離純化結(jié)果進(jìn)行定性分析。具體應(yīng)用分析如下:
一.基礎(chǔ)凝膠成像應(yīng)用
(1)透射UV應(yīng)用:
透射UV:可以對核酸凝膠樣品進(jìn)行圖象采集并進(jìn)行定性和定量分析,常用的由透射紫外激發(fā)的核酸染料包括EB、SYBR Green、SYBR Gold、SYBR Safe、SYBRO ORANGE、SYBRO RUBY、Texas Red、GelStar、GelRed、GeneFinder、Goldview等。
(2)可見光應(yīng)用:
反射白光:主要用于平板克隆計數(shù),預(yù)覽,預(yù)染marker的成像、觀察等;
反射藍(lán)光:凝膠/印跡 , GFP & eGFP 熒光檢測等;
透射白光/藍(lán)光:
染色蛋白凝膠 ,銀染 ,考馬斯亮藍(lán)染色后的樣品成像、觀察;
藍(lán)光激發(fā)的核酸染料如GelGreen、GenGreen染色的核酸凝膠的觀察和成像;
反射紫外:254 & 365nm,主要用于不透光的薄膜層析(TLC)成像和觀察;
二.熒光相關(guān)凝膠成像應(yīng)用
一般的凝膠成像廠家,比如UVItec,在熒光成像模塊會配備RGB(紅綠藍(lán))點狀LED光源,根據(jù)不同激發(fā)波長的熒光染料選擇相應(yīng)的光源進(jìn)行激發(fā)。此模塊主要用來進(jìn)行熒光印跡,針對研究多種蛋白及蛋白之間相互作用的客戶,可以選擇多重?zé)晒庠囼?,以及小動物活體成像(GFP/IRFP)實驗等。
三.化學(xué)發(fā)光相關(guān)凝膠成像應(yīng)用
化學(xué)發(fā)光模塊主要用于蛋白印跡 實驗,即Western Blotting。化學(xué)發(fā)光模塊主要用于ECL、ECL Plus、SuperSignal等化學(xué)發(fā)光顯色液進(jìn)行顯色的WB樣品。
以UVItec多功能凝膠成像系統(tǒng)Alliance Q9 Chroma為例,其多色熒光模塊應(yīng)用列表如下:
綜上所述,凝膠成像儀具有靈敏度高、成像清晰、使用方便的特點,應(yīng)用于DNA、RNA電泳凝膠、蛋白膠、放射自顯影、薄層層析板、酶標(biāo)板、培養(yǎng)器皿等成像和分析。廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)、分子生物學(xué)、法醫(yī)物證、遺傳學(xué)、基因診斷、病毒、環(huán)保、育種,細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域,是從事教學(xué)和科研單位不可缺少的分析儀器。
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